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1.RNA提取的樣品很重要，包括樣品的質量，細胞數，雜質含量等等，建議：按照說明書的要求，每毫升TRIzol不超過100mg再低些在50mg左右;樣品的質量一定要控制好；研磨得時間不宜過長，成粉狀即可，液氮常加（研磨的意義主要是使細胞與TRIzol的作用更充分，如有團塊挑出取質舍量）；作用時間15分鐘；

 

2.氯仿抽提，一定要混勻，劇烈些沒關系。但一定要充分作用；

 

3.異丙醇沉淀，混勻，冰上操作會在一定程度上增加RNA產量；

 

4.75%乙醇清洗一次即可，速度我一般選擇高速8000g-10000g之間的，結果都可；

 

5.檢樣，zui主要的是配置的瓊脂糖膠和電泳緩沖液一定要避免RNA酶的污染，如果有固相RNA酶去除劑，可以用其處理電泳槽5-10后（時間以說明書為準），用高壓后的DEPC水沖洗即可，方便，呵呵；

 

以上是我認為在RNA提取過程的體會，歡迎大家討論，至于反應的時間按照說明書調整，其實說明書已經放的比較寬了，這個我覺得沒有必要討論。